Fecundación In Vitro con Microscopio: Procedimiento ICSI Detallado

La fecundación in vitro (FIV) es una técnica de reproducción asistida que ofrece soluciones a los problemas de fertilidad de multitud de parejas. La inyección intracitoplasmática de espermatozoides, abreviada como ICSI, es uno de los pasos de un tratamiento de fecundación in vitro (FIV). En concreto, la ICSI hace referencia al método de fecundación de los óvulos con los espermatozoides. No obstante, muchas personas suelen utilizar el término ICSI o FIV-ICSI para referirse al proceso completo del tratamiento de fertilidad.

Microinyección de espermatozoide en un óvulo durante el ICSI.

La ICSI tiene ciertos pasos que son completamente iguales al proceso de la FIV convencional. La diferencia entre los dos métodos radica en la forma en la que se produce la fecundación en el laboratorio una vez se han obtenido los óvulos y los espermatozoides.

ICSI (Fecundación In Vitro): Paso a Paso

Fases del Tratamiento de FIV-ICSI

A continuación, se describen cada una de las fases del tratamiento de la FIV-ICSI.

Estimulación Ovárica Controlada

La estimulación ovárica consiste en la administración de medicación hormonal para que varios folículos ováricos consigan madurar de forma simultánea. De esta manera, será posible obtener un número mayor de óvulos para fecundarlos en el laboratorio y aumentar la posibilidad de embarazo. Además, gracias a la estimulación ovárica, se consigue controlar el ciclo menstrual de la mujer y evitar que tenga lugar la ovulación espontánea, lo cual haría fracasar el ciclo de FIV-ICSI.

Antes de empezar con la estimulación ovárica, el especialista puede indicar en algunos casos tomar la píldora anticonceptiva para poder controlar y sincronizar el ciclo menstrual de la mujer.

En función de la duración de la estimulación ovárica, existen dos protocolos básicos en las pacientes de FIV:

  • Protocolo largo: se inicia antes de la menstruación con los pinchazos de los fármacos agonistas de la GnRH, los cuales sirven para frenar la hipófisis y evitar la secreción de hormonas endógenas. Una vez llega la regla, se combinan los pinchazos anteriores con los de gonadotropinas para iniciar el desarrollo folicular múltiple.
  • Protocolo corto: el número de pinchazos se reduce, ya que la estimulación con gonadotropinas se inicia después de la llegada de la menstruación. Sobre el día 6-7 del ciclo, se empiezan a administrar los pinchazos con antagonistas de la GnRH para hacer el frenado hipofisiario.

En los últimos años, ha habido una tendencia a la simplificación de los protocolos de estimulación ovárica controlada.

La fase de administración de gonadotropinas (FSH) suele tener una duración aproximada de 6-10 días. Durante este tiempo, la paciente tendrá que acudir a control ecográfico unas 2 o 3 veces para comprobar el crecimiento folicular.

Punción Folicular

El primer paso de la FIV es realizar una estimulación de los folículos ováricos. A partir del segundo-tercer día de regla, se administra diariamente una medicación que produce el crecimiento de toda la cohorte folicular. Durante estos días es necesario acudir a controles a la clínica donde se va monitorizando la respuesta ovárica mediante ecografía ginecológica transvaginal y analítica hormonal. Aproximadamente a partir del día 5-6 de estimulación, se añade además otra medicación subcutánea que evita la ovulación prematura.

A las 34 horas de la administración de la medicación que produce la ovulación, se realiza la recuperación de ovocitos mediante punción ovárica. Para ello, en quirófano y con sedación, el ginecólogo obtiene los ovocitos contenidos en el interior de los folículos.

La punción folicular consiste en la aspiración del líquido contenido en los folículos ováricos para extraer los óvulos a través de una punción vaginal ecoguiada. Esto es una sencilla intervención de unos 30 minutos de duración que se realiza en el quirófano bajo anestesia, por lo que la paciente no siente dolor.

Unas 30-34 horas antes de la punción ovárica, la paciente debe administrarse una inyección de hormona hCG para desencadenar la ovulación e inducir la maduración final de los óvulos.

Una vez en el laboratorio, el líquido folicular aspirado debe examinarse detalladamente bajo la lupa para localizar los óvulos y trasladarlos a una placa con medio de cultivo.

Decumulación de los Óvulos

Esta etapa del proceso de la ICSI consiste en la eliminación de la capa de células de la granulosa que rodea al óvulo.

La decumulación de los óvulos, también conocida como denudación, es un paso necesario antes de hacer la microinyección intracitoplasmática de espermatozoides. Para llevar a cabo el decumulado de los ovocitos, es necesario esperar unas horas después de la punción folicular porque el óvulo experimenta una maduración final durante este tiempo en reposo.

Existen dos técnicas para la decumulación ovocitaria:

  • Decumulación química: se utiliza un medio con hialuronidasa, una enzima que degrada el ácido hialurónico que une las células de la granulosa entre sí. En la fecundación natural, la hialuronidasa es secretada por el espermatozoide para poder penetrar el óvulo.
  • Decumulación mecánica: el óvulo se va pasando por pipetas de diferente calibre, de mayor a menor diámetro, hasta despegar por completo todas las células que lo rodean.

Normalmente, los protocolos del laboratorio de FIV combinan ambos métodos para decumular los óvulos de manera más eficaz.

Después de la decumulación, hay que comprobar si los óvulos son maduros para poder hacer la ICSI. Para ello, es necesario visualizar un corpúsculo polar en el espacio perivitelino del óvulo.

Recogida y Preparación del Semen

Para cualquier técnica de Fecundación In Vitro, la muestra de semen es tratada mediante un proceso de lavado y selección espermática mediante Gradientes de Densidad o Swim-Up. Además de estas técnicas, en el laboratorio de reproducción asistida podemos realizar una selección de los espermatozoides que presentan una mejor morfología.

El mismo día de la punción folicular, el hombre debe dejar una muestra de semen en el laboratorio recogida por masturbación, a no ser que vaya a utilizarse semen congelado o de donante.

Para la preparación de la muestra seminal, es necesario hacer una capacitación espermática: se elimina el plasma seminal y se concentran los espermatozoides de mayor calidad en un medio de cultivo nuevo.

El objetivo es conseguir una muestra de espermatozoides móviles progresivos de un millón por mililitro aproximadamente, ya que si hubiera más espermatozoides sería difícil seleccionarlos bajo el microscopio.

Por otra parte, en los casos de factor masculino severo, es posible que se obtenga un menor número de espermatozoides y de peor calidad. De hecho, a veces es necesario obtener los espermatozoides con una biopsia testicular para hacer la ICSI.

No obstante, aunque sea más complicado, la ICSI también puede hacerse bajo estas condiciones, pues solamente son necesarios tantos espermatozoides vivos como óvulos se vayan a microinyectar.

Fecundación con ICSI

La manera de fecundar los óvulos es la que diferencia a la técnica de la ICSI de la FIV convencional.

Como su propio nombre indica, la ICSI consiste en la inyección del espermatozoide directamente dentro del citoplasma del óvulo. Para ello, se siguen los siguientes pasos cuidadosamente:

  1. Preparación inicial: se colocan las pipetas de sujeción (holding) y de microinyección (ICSI) en un microscopio invertido. A continuación, se prepara la placa de ICSI con gotas de medio de cultivo donde se colocarán los óvulos por una parte y los espermatozoides por otra.
  2. Selección del espermatozoide: se observa la muestra de espermatozoides buscando el de mejor calidad y, una vez seleccionado, debe inmovilizarse con un movimiento rápido de la pipeta de ICSI para fracturar su cola. A continuación, se aspira el espermatozoide con esta misma pipeta.
  3. Orientación del óvulo: para no dañar las estructuras internas del óvulo con la inyección, este se coloca orientado con su corpúsculo polar en la parte superior o inferior y es sujetado por la pipeta holding para que no se mueva.
  4. Inyección intracitoplasmática: se presiona suavemente al óvulo con la pipeta de inyección para traspasar la zona pelúcida y la membrana interna. Una vez dentro del óvulo, se aspira un poco de citoplasma hasta ponerlo en contacto con el espermatozoide y, a continuación, se introduce suavemente en el interior del óvulo.
  5. Valoración final: el tipo de rotura del óvulo aporta información sobre la calidad ovocitaria y puede condicionar su desarrollo posterior. El tipo de rotura puede ser por presión o por aspiración.

Por último, una vez microinyectados, se guardan los óvulos en placas de cultivo en el incubador, a la espera de valorar al día siguiente si ha habido fecundación.

Proceso de Microinyección Intracitoplasmática (ICSI).

Cultivo Embrionario

Después de la fecundación y durante todo el desarrollo embrionario, es necesario valorar las características de los embriones con el objetivo de seleccionar aquellos de mejor calidad y con mayor posibilidad de implantar.

En función del estadio de desarrollo en el que se encuentre el embrión, se valorarán unos parámetros u otros:

  • Cigotos: se valoran unas 18 horas postfecundación para ver si han aparecido los dos corpúsculos polares y los dos pronúcleos, lo cual indicará que la fecundación ha tenido éxito.
  • Embriones de 2-3 días: el embrión ya se ha dividido y, por tanto, se valoran el número de células, su simetría, la fragmentación, la multinucleación, si hay vacuolas, etc.
  • Blastocistos de 5-6 días: en este estadio, el embrión ya está formado por multitud de células que forman la masa celular interna y el trofoectodermo. También se valora el grado de expansión de los blastocistos y si han empezado a salir de la zona pelúcida, lo cual se conoce como hatching.

Transferencia de los Embriones

Teniendo en cuenta las circunstancias particulares de cada paciente y el número de embriones de buena calidad obtenido, la transferencia embrionaria puede realizarse en día 3 o en día 5 de desarrollo embrionario. Para ello, se seleccionará el embrión o embriones de mejor calidad en base a los parámetros comentados.

Antes de la transferencia embrionaria, la mujer suele administrarse progesterona para una óptima preparación endometrial.

El procedimiento de transferencia embrionaria es muy sencillo y no requiere anestesia. En primer lugar, se coge el embrión seleccionado con un catéter fino y, seguidamente, se introduce por la vagina de la mujer hasta llegar al útero. Gracias a la ecografía que se hace simultáneamente, es posible ver cómo se deja al embrión en el útero con el objetivo de que se produzca la implantación.

Una vez depositado el embrión en el útero de la mujer, el personal del laboratorio comprobará la cánula bajo el microscopio para asegurarse de que el embrión no se ha quedado ahí.

Congelación de los Embriones

En muchos ciclos de FIV quedarán embriones sobrantes después de la transferencia embrionaria, pues la legislación española solo permite transferir un máximo de 3 embriones.

Cada vez existe una tendencia mayor a transferir solamente un embrión en lugar de dos o tres. La principal razón es evitar la posibilidad de un embarazo múltiple y los riesgos que puede conllevar, tanto para la madre como para los fetos.

En consecuencia, los embriones que no son transferidos en el primer intento son vitrificados para usarlos en futuras ocasiones, bien porque la primera transferencia no ha tenido éxito, o bien para poder tener un segundo hijo en el futuro.

Para poder vitrificar los embriones, estos deben tener una calidad buena o media, de manera que se pueda garantizar la supervivencia de los embriones después de la desvitrificación.

Otra opción para los embriones sobrantes sería donarlos a otros pacientes o a la investigación.

Test de Embarazo después de la ICSI

La paciente deberá esperar alrededor de 9-12 días para hacer una prueba de embarazo y comprobar si la FIV-ICSI ha tenido éxito. Esta prueba se puede realizar en orina o en sangre, pero ambas se basan en detectar si hay presencia de beta hCG.

Por ello, comúnmente se conoce a este periodo de tiempo entre la transferencia embrionaria y la realización del test de embarazo como betaespera. La mayoría de los especialistas recomiendan seguir con la rutina diaria (sin realizar esfuerzos) durante la betaespera.

IMSI: Inyección Intracitoplasmática de Espermatozoides Morfológicamente Seleccionados

La búsqueda de la maternidad o paternidad puede llevar a muchas parejas a explorar diferentes opciones cuando la concepción natural parece inalcanzable. La tecnología médica ha avanzado significativamente en este campo y una de las técnicas más recientes y prometedoras es el IMSI, o Intracytoplasmic Morphologically Selected Sperm Injection. Pero ¿qué ventaja aporta respecto al ICSI ? ¿Cómo se realiza? Te lo explicamos todo a continuación.

El IMSI es un procedimiento que ha revolucionado la selección morfológica de los espermatozoides para la fertilización in vitro (FIV). El IMSI utiliza un microscopio altamente especializado con la tecnología MSOME (Motile Sperm Organelle Morphology Examination), aproximadamente cinco veces más potente que los microscopios tradicionales de un laboratorio de reproducción asistida . Con esta herramienta, los biólogos pueden obtener más de 6.000 aumentos, lo que les permite examinar los espermatozoides de manera detallada a tiempo real.

De esta manera, los embriólogos pueden identificar y descartar aquellos que tienen defectos en su estructura como en la cola, la cabeza o pieza intermedia. Esta selección minuciosa es fundamental, ya que un óvulo fecundado por un espermatozoide alterado tiene un alto riesgo de resultar en aborto espontáneo.

Gracias al IMSI, podemos incrementar significativamente las tasas de fecundación, disminuir los fallos de implantación y mejorar la calidad embrionaria, lo que brinda a las parejas que enfrentan desafíos de fertilidad una mayor esperanza y oportunidad de éxito en el proceso de reproducción asistida.

¿Cuándo se indica un IMSI?

En principio, el IMSI está pensado para cualquier persona que vaya a someterse a un ciclo de fecundación in vitro con microinyección espermática (ICSI). Sin embargo, hay situaciones específicas en las que esta técnica puede ser especialmente beneficiosa:

  • En casos de teratozoospermia
  • Casos de oligoastenoteratozoospermia severa
  • Alta fragmentación del ADN espermático
  • Fallos de fecundación con ICSI
  • Mala calidad embrionaria
  • Fallos de implantación
  • Esterilidad de origen desconocido

Tabla Resumen de Etapas de la FIV-ICSI

Etapa Descripción
Estimulación Ovárica Administración de hormonas para madurar múltiples folículos.
Punción Folicular Extracción de los óvulos mediante aspiración.
Decumulación Eliminación de las células que rodean el óvulo.
Preparación del Semen Selección y capacitación de los espermatozoides.
Fecundación (ICSI) Inyección de un espermatozoide directamente en el óvulo.
Cultivo Embrionario Desarrollo y evaluación de los embriones en el laboratorio.
Transferencia Embrionaria Colocación del embrión en el útero.
Congelación Vitrificación de embriones no transferidos.
Test de Embarazo Confirmación del embarazo mediante análisis de hCG.

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